Station d’automatisation Fluent^®

L’acétylation et la désacétylation des histones jouent un rôle très important dans la régulation de l’expression des gènes. Les histones désacétylases (HDAC) forment un groupe d’enzymes qui enlèvent les groupes acétyle des acides aminés ε-N-acétyle lysine sur les histones, leur permettant d’envelopper l’ADN plus étroitement, ce qui condense la structure de l’ADN et empêche la transcription. À l’inverse, l’acétylation neutralise les charges positives sur les histones en transformant les amines en amides, réduisant leur capacité de liaison à l’ADN, ce qui permet l’expansion de la chromatine et la transcription génétique. Les 18 enzymes HDAC identifiées à ce jour sont soit dépendantes du zinc, soit dépendantes du nicotinamide adénine dinucléotide (NAD-dépendantes). Elles sont réparties en quatre classes sur la base de leur homologie avec les protéines de levure. Les classes I, II et IV correspondent aux HDAC « classiques » et sont inhibées par la trichostatine A (TSA). En raison de l’implication des HDAC dans diverses maladies et le développement du cancer, les inhibiteurs d’HDAC sélectifs suscitent aujourd’hui un grand intérêt, notamment en tant qu’agents thérapeutiques potentiels.

La défaillance des entités médicamenteuses précliniques est un problème majeur pour les sociétés pharmaceutiques et représente une part substantielle de leur précieux budget de R&D. Il y a donc une nécessité de mettre en place des tests de toxicité des composés dans un environnement à haut débit similaire au dépistage primaire de l’efficacité. Le métabolisme des médicaments est un facteur clé dans la toxicité des composés et la superfamille d’enzymes, cytochrome P450 (CYP), principalement exprimées dans les cellules hépatocytes du foie, jouent un rôle très important dans ce processus. Il existe aujourd’hui des dosages de criblage conçus pour l’automatisation en microplaques pour le profilage à débit moyen de composés susceptibles d’induire ou d’inhiber l’activité du CYP. Dans cette note d’application nous décrivons une méthode de génération de lead dans des microplaques 384 puits au moyen de trois enzymes CYP différentes, illustrant un cycle de dosages type dans un laboratoire ADME.

Depuis de nombreuses années, la découverte de médicaments à petites molécules repose sur l'évaluation d'un composé par rapport à un autre composé. La mesure de l'activité d'une petite molécule par rapport à une cible doit être standardisée, et ceci est réalisé en déterminant la valeur IC50 ou EC50 (concentration inhibitrice médiane et concentration effective médiane, respectivement) en utilisant des courbes dose-réponse. Pour établir des courbes dose-réponse, les composés sont dissous dans un solvant pour créer des solutions de concentrations variables, et le DMSO est devenu le solvant de choix établi. Aujourd'hui, les chimistes fournissent aux biologistes ou aux équipes de gestion des composés responsables de la production des courbes dose-réponse, des solutions de composés préparées dans du DMSO. Le processus commence souvent par le choix des composés cibles clés à partir d'un certain nombre de microplaques différentes, généralement dénommé "hit-picking". Ces composés clés ont généralement été sélectionnés sur la base de données de concentration uniques provenant d'une campagne de criblage à haut débit (HTS).

Pendant de nombreuses années, la découverte de médicaments à petite molécule était fondée sur l’évaluation d’un composé par rapport à un autre. La mesure de l’activité d’une petite molécule par rapport à une cible doit être normalisée, ce qui est réalisé en déterminant la valeur CI50 ou CE50 (respectivement la concentration inhibitrice/efficace médiane maximale) au moyen de courbes dose-réponse. Pour établir des courbes dose-réponse, les composés doivent être dissouts dans un solvant afin de créer des solutions de concentrations variables. DMSO s’est avéré le solvant de choix. Aujourd’hui, les chimistes fournissent aux biologistes, ou aux équipes de gestion des composés responsables de la production, des courbes dose-réponse avec des solutions de composés préparées dans du DMSO. Le déroulement des tâches commence souvent par la sélection des composés cibles clés à partir d’un certain nombre de microplaques différentes, généralement appelée le « hit-picking ». Ces composés clés ont souvent été sélectionnés sur la base de données de concentration uniques provenant d’une campagne de criblage haut débit (HTS).

La capacité de réaliser des dosages de récepteurs couplés aux protéines G (RCPG) à haut débit est un élément clé du processus de découverte de médicaments. Combiner une solution d’automatisation de laboratoire Fluent, configurée pour des dosages cellulaires, avec les kits de dosages DiscoveRx de PathHunter β-arrestine et du RCPG humain et orthologue, donne aux utilisateurs la possibilité d’exécuter des dosages sur plaques 384 puits à haut débit. Cette vitesse et cette capacité de traitement accrues par rapport aux solutions actuelles, combinées à un usage extrêmement efficace de l’espace de laboratoire, en font un système supérieur pour les dosages cellulaires.

Le panel NCI-60 représente une grande diversité de types de cancers courants et constitue l’un des outils les plus importants dans la découverte moderne de médicaments pour l’identification de nouveaux composés. Bien que les lignées cellulaires soient couramment utilisées dans les dosages phénotypiques pour le suivi de la croissance et de la survie des cellules, lorsqu’elles sont combinées avec des outils bioinformatiques, tels que la base de données COMPARE du NCI, les données du panel NCI peuvent également fournir une indication préliminaire des mécanismes d’action potentiels des nouveaux composés. En règle générale, les ensembles de composés sont initialement testés à un seul taux de concentration. Les résultats montrant une inhibition de la croissance ou des propriétés cytotoxiques sont caractérisés au format dose-réponse sur plusieurs lignées cellulaires afin d’établir la puissance et la sélectivité du composé.

L'épigénétique joue un rôle important dans la découverte de médicaments depuis de nombreuses années, mais son importance s'est considérablement accrue récemment en raison du rôle que les modifications épigénétiques peuvent jouer dans le cancer et la différenciation des cellules souches. La méthylation est la principale modification épigénétique de l'ADN et de protéines appelées histones, qui organisent l'ADN en chromatine à l'intérieur d'une cellule. Les modifications épigénétiques définissent la manière dont l'information génétique est lue et utilisée par les cellules et, au fil des divisions cellulaires, ces changements épigénétiques peuvent persister tout au long de la vie de la cellule. Ils peuvent également perdurer sur plusieurs générations, même s'ils ne se caractérisent pas par des modifications de la séquence d'ADN fondamentale de l'organisme. Les modifications épigénétiques peuvent donc être héritées, et sont influencées par des facteurs environnementaux, dont certains peuvent induire une action de signalisation épigénétique susceptible de contribuer à des processus biologiques tels que le vieillissement. Les tests cellulaires EPIgeneous de Cisbio permettent de mesurer directement la méthylation, la déméthylation et les protéines totales sur des cellules adhérentes ou en suspension. Tecan a réinventé l'automatisation avec le Fluent, un concept d'instrumentation unique conçu autour des besoins spécifiques de votre laboratoire. Fluent innove en offrant une plus grande capacité et une vitesse accrue.

Cela fait des années que l’épigénétique joue un rôle important dans la découverte de médicaments, mais son importance s’est sensiblement accrue récemment en raison de l’influence que les modifications épigénétiques peuvent avoir dans le cancer et la différentiation des cellules souches. La méthylation est la principale modification épigénétique de l’ADN et des protéines appelées histones, qui empaquettent l’ADN dans la chromatine à l’intérieur d’une cellule. Les modifications épigénétiques définissent de quelle manière l’information génétique est lue et utilisée par les cellules et, par le biais des divisions cellulaires, ces modifications peuvent durer tout au long de la vie de la cellule. Ce phénomène peut également s’étendre sur plusieurs générations, même si cela n’implique pas de modifications dans la séquence ADN sous-jacente de l’organisme. Les modifications épigénétiques sont donc potentiellement héréditaires et sont influencées par des facteurs environnementaux, dont certains peuvent induire des signaux épigénétiques susceptibles de contribuer à des processus biologiques tels que le vieillissement. Les dosages à base de cellules Cisbio EPIgeneous permettent de mesurer directement la méthylation, la déméthylation et les protéines totales sur les cellules adhérentes et en suspension.

Les immunosuppresseurs appuient la transplantation d'organes solides en prévenant le rejet par le système immunitaire du patient. Cette note d'application présente un exemple de protocole de préparation d'échantillons automatisée, développé par Tecan pour le kit de dosage MassTox® Immunosuppressants in Whole Blood - ONEMinute Test - LC-MS/MS (Chromsystems) sur la plateforme d’automatisation Fluent® Mix and Pierce Workstation.

Fluent a été conçu et élaboré pour accroître le débit et la productivité des laboratoires en leur permettant de faire plus en moins de temps – et avec moins d’espace.

Pour ceux qui « appuient sur des touches », les activités quotidiennes telles que la réalisation de dosages et l’entretien du système deviennent aussi simples que l’utilisation d’un smartphone. Les utilisateurs savent intuitivement ce qu’ils doivent faire à l’étape suivante.

Fluent Gx apporte les améliorations de performance éprouvées de la solution d’automatisation de laboratoire Fluent aux laboratoires hautement réglementés. Les flux de travail des applications dans les domaines cliniques et autres domaines réglementés peuvent bénéficier de débits élevés, de la facilité d’utilisation, ainsi que d’une précision et d’une exactitude exceptionnelles avec une sécurité maximale des processus.

Fluent, la plateforme révolutionnaire développée par Tecan, offre une vitesse et une flexibilité inégalées pour le formatage et la reproduction des plaques. Le débit et la précision sont primordiaux. C’est pourquoi nous avons conçu une solution compacte d’automatisation composée de trois bras qui fonctionnent en parallèle sur la plateforme dynamique Dynamic Deck™ offrant des capacités exceptionnelles. Découvrez l’instrument qui parle la langue de votre laboratoire et qui rend la gestion des composés plus simple, plus efficace… et plus fluide.

Une intégration parfaite des technologies de dosage cellulaire qui rationalise vos flux de travail et simplifie la vie de votre laboratoire.

La conception révolutionnaire de Fluent offre des capacités et une vitesse accrues pour les tâches relevant de la génomique. Cette solution novatrice offre une précision supérieure, des débit plus élevés et des temps d’autonomie plus longs. Faites plus, en moins de temps et avec une plus grande confiance.

Le bras multicanaux MultiChannel Arm™ 384 a été conçu pour accroître la productivité des tâches de manipulation de liquides automatisées dans les applications de recherche pharmaceutiques et biotechnologiques, et ainsi augmenter l’efficacité et la vitesse des processus de pipetage, le tout combiné à un niveau de flexibilité exceptionnel.

Pour Freedom EVO® et Fluent®

Quantification précise des acides nucléiques et contrôles de qualité, sans perte d'échantillon.

Module pour la plateforme d’automatisation Fluent® : spécifications et performances standards.

Le dosage du sang total est effectué régulièrement pour les patients prenant des médicaments qui sont absorbés par les cellules sanguines, comme les immunosuppresseurs prescrits après une transplantation d'organe. Cependant, la préparation des échantillons est un défi pour les laboratoires qui utilisent la LC-MS pour la quantification des médicaments. La plateforme d’automatisation Fluent® Mix and Pierce permet le traitement automatisé des kits de dosage des immunosuppresseurs, offrant homogénéité et précision. Cette brochure présente un exemple de protocole de préparation d'échantillons automatisée développé par Tecan pour le kit de dosage MassTox® Immunosuppressants in Whole Blood - ONEMinute Test - LC-MS/MS (Chromsystems).

La plateforme d’automatisation Fluent Gx Mix and Pierce permet aux utilisateurs de développer des protocoles de travail dans le cadre d’investigations médico-légales. Les échantillons prélevés sur les scènes de crime étant précieux et ne pouvant être renouvelés, toute perte de matériel doit être évitée. La plateforme d’automatisation Fluent Gx Mix and Pierce minimise le risque de perte d'échantillons en ajoutant les solvants d'extraction directement dans les tubes de prélèvement et en les mélangeant de manière contrôlée. Ce document présente un exemple de flux de travail pour des échantillons non-biologiques.

The Multiple Channel Arm™ 96 (MCA 96) for the Fluent® liquid handler offers an incredible volume range ideal for high-throughput workflows.

Spécifications Fluent.

Détection capacitive améliorée du niveau de liquide pour une fiabilité et une reproductibilité accrues. Bien que la vitesse et le débit apparaissent comme des raisons logiques d’acquérir un système de manipulation de liquides automatisé, la constance des résultats constitue un atout encore plus précieux pour de nombreux utilisateurs. Fonctionnalité très discrète qui se remarque à peine, la détection du niveau de liquide joue un rôle essentiel pour garantir la fiabilité et la cohérence des processus de pipetage, mais les technologies de détection de niveau de liquide ne sont pas toutes conçues de la même façon. La technologie adaptative des signaux de Tecan est une nouvelle génération de détection capacitive de niveau de liquide qui fait bien plus que juste détecter le niveau de liquide dans le puits d’une microplaque ; elle est fiable pour faire la distinction entre le niveau réel de liquide et les bulles, détecter les occlusions d’embouts, empêcher le débordement des puits et offrir de nouvelles possibilités de traitement des erreurs en cours de processus.

La réduction du volume mort est un aspect particulièrement souhaitable pour les performances d'une plateforme de transfert de liquide, notamment dans le cas de réactifs onéreux ou d'échantillons rares et précieux. La réduction du volume mort permet non seulement de réaliser des économies substantielles sur les réactifs et les échantillons, mais aussi d'effectuer plus de tests par unité de volume, ce qui réduit encore les coûts et permet d'obtenir plus de données par cycle. Les solutions d'automatisation pour le laboratoire Fluent dotées de la détection avancée du niveau de liquide Adaptive Signal Technology™ (AST) offrent de nombreux avantages complémentaires qui réduisent le volume mort sans compromettre la précision ou l'exactitude des transferts de liquide.